液氮罐在細胞培養過(guò)程中的使用

　　液氮罐在細胞培養過(guò)程中的使用

　　細胞培養的一般過(guò)程主要包括四個(gè)步驟:準備、材料提取、培養和冷凍復蘇。為了保存細胞，尤其是不易獲得的突變細胞或細胞株，應冷凍細胞。冷凍溫度一般采用196℃液氮溫度，將細胞收集到冷凍管中，加入含有保護劑(一般為二甲基亞或甘油)的培養基，冷卻速度一定，后儲存在液氮罐中。在低的溫度下，細胞的保存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。

　　胚胎冷凍保存技術(shù)

　　胚胎冷凍保存技術(shù)是指利用低溫保護劑在低溫條件下保存胚胎的技術(shù)。這項技術(shù)是由于人工授精技術(shù)在20世紀下半葉的廣泛應用而產(chǎn)生的。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理是由于低溫降低了胚胎內的變質(zhì)反應速度。溫度越低，胚胎保存時(shí)間越長(cháng)。

　　目前研究了慢速冷凍、快速冷凍、一步冷凍、直接移植冷凍、玻璃化冷凍等多種胚胎冷凍保存方法。玻璃化冷凍法的步驟如下:

　?、僭谑覝叵聦⑴咛シ湃?5%的玻璃溶液(VS液)中進(jìn)行預處理15分鐘。

　?、谠诟邼舛?75%190%)的VS液中保存預處理后的胚胎20-40分鐘。金鳳液氮罐

　?、蹖⒔?jīng)過(guò)兩步抗凍處理的胚胎直接放入液氮中保存。金鳳液氮罐

　　另外，菌種、疫苗、骨組織、精子等物質(zhì)也可以用液氮罐保存，都能達到良好的長(cháng)期儲存效果。