準備工作
在進(jìn)行細胞取出前,首先需要準備好液氮罐和所需的工具。液氮罐應處于穩定的工作臺或地面上,確保罐體穩固不會(huì )傾斜或搖晃。同時(shí),檢查液氮罐的液位,確保液氮足夠用于細胞取出過(guò)程。另外,準備好細胞取出所需的工具,包括長(cháng)柄鑷子、無(wú)菌手套、小型達瓦瓶等。
細胞取出過(guò)程
1.
預先準備:在取出細胞之前,先將所需的培養基和培養皿放置在無(wú)菌工作臺上,使其保持在適當的溫度和濕度條件下。檢查培養基的質(zhì)量和過(guò)期日期,確保培養基的有效性。
2.
打開(kāi)液氮罐:小心打開(kāi)液氮罐的蓋子,使用長(cháng)柄鑷子輕輕夾住存放細胞的提桶,避免直接接觸液氮。在打開(kāi)罐蓋時(shí),注意保持周?chē)沫h(huán)境安靜,避免突然的聲音或震動(dòng),以防止罐內液氮濺出。
3.
取出細胞:使用長(cháng)柄鑷子將待取出的細胞罐從液氮罐中取出,放置在預先準備好的冰桶中。在取出過(guò)程中,要確保動(dòng)作輕柔,避免罐子受到碰撞或振動(dòng),以防止細胞損傷或死亡。
4.
迅速轉移:將細胞罐迅速轉移到無(wú)菌工作臺上,立即將其浸入預先加熱的培養基中。迅速轉移細胞的目的是為了大限度地減少細胞暴露在液氮的時(shí)間,減少細胞受到冷凍傷害的風(fēng)險。
細胞取出液氮罐是細胞凍存過(guò)程中的關(guān)鍵步驟之一,正確的操作可以保護細胞的完整性和生存率,確保實(shí)驗結果的準確性和可重復性。通過(guò)嚴格遵循標準的操作流程和安全注意事項,可以有效地進(jìn)行細胞取出,并保障操作人員和實(shí)驗室環(huán)境的安全。
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